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大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA試劑盒

  • 產品型號:
  • 產品時間:2024-08-10
  • 簡要描述:凡購買慧穎生物大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA試劑盒,提供免費代測服務,收到樣本后,三個工作日內出結果。本試劑盒僅供科研使用,不得用于其它。
  • 產品簡介

大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA試劑盒檢測原理:

本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 HCY 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的 HCY與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠HCY,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,zui后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,HCY濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中HCY濃度。

大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA試劑盒操作流程:

  1. 標準品的稀釋與加樣:標準品按照說明書稀釋好五個梯度,各個梯度每孔加樣量都為50μl,
  2. 加樣:分別設空白孔、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4. 配液洗滌:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用;小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  6. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  7. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應
  10. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

11.計算:

以標準物的濃度為綜坐標,OD值為橫坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標 準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

注意事項:

 1. 以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。

 2. 洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高。

 3. 板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。

 4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。

 5. 本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!

 

 

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