成人观看视频-成人观看网站a-成人国产mv免费视频-成人国产第一区在线观看-成人国产激情福利久久精品-成人国产精品

服務熱線:
15821734033
產品展示

您現在的位置:首頁  >  產品展示  >  ELISA試劑盒  >  人ELISA試劑盒  >  人類免疫缺陷病毒1型p24抗原 試劑盒

人類免疫缺陷病毒1型p24抗原 試劑盒

  • 產品型號:
  • 產品時間:2024-08-10
  • 簡要描述:人類免疫缺陷病毒1型p24抗原 試劑盒 慧穎生物優勢供應,提供免費代測和技術服務,人試劑盒,鼠試劑盒等更多試劑盒,上海慧穎生物有限公司!!
  • 產品簡介

人類免疫缺陷病毒1p24抗原

酶聯免疫試劑盒

【產品名稱】

通用名:人類免疫缺陷病毒1p24抗原酶聯免疫試劑盒

英文名:ENZYME IMMUNOASSAY FOR DETECTION OF HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE I P24 ANTIGEN IN HUMAN SERUM, PLASMA AND CELL CULTURE SUPERNATANT

【包裝規格】

96人份/盒。

【預期用途】

本試劑盒用于人類免疫缺陷病毒1p24抗原(Human Immunodeficiency Virus Type 1 p24 Antigen)的定量檢測,適用于人血清(或血漿)及細胞培養上清液等標本,僅供研究使用。

【檢驗原理】

本產品采用固相酶聯免疫吸附分析法Enzyme-linked Immunosorbent AssayELISA檢測人血清(或血漿)中的游離HIV-1 p24抗原和細胞培養上清液等標本中的HIV-1 p24抗原。本分析方法是基于雙抗體夾心的非競爭性免疫分析。校準品和樣品中HIV-1 p24抗原與固相抗- p24單克隆抗體和生物素標記的抗-p24多克隆抗體通過免疫反應,形成固相抗-p24單克隆抗體p24抗原—抗-p24多克隆抗體-生物素復合物;溫育后洗滌,洗去非特異或多余的抗原和多余的生物素標記的抗- p24多克隆抗體;然后加入HRPHorseradish Peroxidase,辣根過氧化物酶)標記的鏈親和素,形成固相抗- p24單克隆抗體p24抗原-p24多克隆抗體-生物素—鏈親和素-HRP復合物;溫育后洗滌,洗去多余的HRP標記的鏈親和素。加入TMB-H2O2底物溶液,HRP催化H2O2氧化TMB生成藍色的產物(zui大吸收峰655nm),加入終止液終止酶催化反應,生成黃色產物(zui大吸收峰450nm)。其吸光度與校準品和樣品中的HIV-1 p24抗原濃度成正相關。通過劑量-反應曲線可得出樣品中HIV-1 p24抗原濃度。

 

試驗類型

溫育時間

試驗所需時間

試驗溫度

試驗所需樣本體積

免疫度量分析

120 分鐘

大約150分鐘

37°C 和室溫(18~30℃

75μL

 

 

 

【主要組成成份】

 

  1. 抗體包被板    

Antibody Coated Microplate

1

包被有鼠抗-HIV-1 p24單克隆抗體的聚苯乙烯微孔板,約200ng/孔。8×12條。

鋁箔袋密封包裝,含干燥劑。標簽編號為R1

  1. HIV-1 p24抗原校準品

HIV-1 p24 Antigen Calibrator

1mL×1

重組HIV-1 p24抗原溶液,200IU/mL(約相當于4,000pg/mL),稀釋液為校準品稀釋液。用英國國家生物標準與檢定所(National Institute for Biological Standards and Control, NIBSC)提供的WHO標準品(HIV-1 p24 Antigen 90/636)校準。

綠色PP蓋子和無色PP塑料管。標簽編號為R2

  1. 校準品稀釋液

Calibrator Diluent

20mL×1

磷酸鹽緩沖液,含動物血清和鈣化的正常人血漿(經ELISA檢測,HBsAg、抗-HCV和抗-HIV 1+2均為陰性),pH7.3。防腐劑為NaN3(不超過0.1%)和EDTA

綠色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標簽編號為R3

  1. 生物素標記抗體

Biotinylated Antibody

5mL×1

生物素標記的兔抗-HIV-1 p24多克隆抗體,約4µg/mL。緩沖液為Tris-HCl,含動物血清、穩定劑、表面活性劑和綠色染料,pH7.4。防腐劑為NaN3(不超過0.1%)。

藍色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標簽編號為R4

  1. HRP標記鏈親和素

HRP Conjugated Streptavidin

20mL×1

HRP標記鏈親和素,約0.1µg/mL25mU/mL HRP。緩沖液為Tris-HCl,含動物血清、穩定劑、表面活性劑和紅色染料,pH7.4。防腐劑為ProClin®300(不超過1%)。

紅色PP蓋子和棕色HPDE塑料瓶。標簽編號為R5

  1. 濃縮洗滌液

Concentrated Wash Buffer

50mL×1

含表面活性劑的磷酸鹽緩沖液,20倍濃縮。防腐劑為ProClin®300(不超過1%)。

無色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標簽編號為R6

 

  1. 底物緩沖液

Substrate Buffer

10mL×1

H2O2的乙酸鹽緩沖液,pH5.0

無色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標簽編號為R7

  1. 顯色劑

Chromogen Solution

10mL×1

TMB的乙酸溶液,pH3.0

白色PP蓋子和棕色HPDE塑料瓶。標簽編號為R8

  1. 終止液

Stop Solution

10mL×1

2mol/L H2SO4溶液。

黃色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標簽編號為R9

  1. 封板膜

Plate Sealer

6

用于溫育時微孔板的密封。

  1. 說明書

Instruction for Use

1

本產品使用說明。

【儲存條件及有效期】

試劑盒置2~8℃保存,有效期為12個月。

【適用儀器】

酶標儀、洗板機、恒溫培養箱等。

【樣本要求】

  1. 樣本:人血清(或血漿)樣本,和細胞培養上清液等標本。
  2. 存放:樣本于2~8℃可儲存2天;樣本長期儲存應放置于-20-20℃以下環境中,且不宜反復凍融5次以上。

【檢驗方法】

  1. 試劑配制方法
  • HIV-1 p24校準品系列的配制:

6支離心管,編號ABCDEF。管F中取900µL校準品稀釋液,加入100µL HIV-1 p24校準品(200IU/mL4,000pg/mL),混勻,作1:10稀釋,配制成校準品F20IU/mL400pg/mL);管E中取500µL校準品稀釋液,加入500µL校準品F,混勻,作1:2稀釋,配制成校準品E10IU/mL200pg/mL ;管D中取500µL校準品稀釋液,加入500µL校準品E,混勻,作1:2稀釋,配制成校準品D5IU/mL100pg/mL);管C中取500µL校準品稀釋液,加入500µL校準品D,混勻,作1:2稀釋,配制成校準品C2.5IU/mL50pg/mL);管B中取500µL校準品稀釋液,加入500µL校準品C,混勻,作1:2稀釋,配制成校準品B1.25IU/mL25pg/mL);以校準品稀釋液作為校準品A。共配制成6個濃度的HIV-1 p24校準品系列(A-F):A  0B  1.25IU/mL25pg/mL)、C  2.5IU/mL50pg/mL)、D  5IU/mL100pg/mL)、E  10IU/mL200pg/mL)和 F  20IU/mL400pg/mL。配制好的HIV-1 p24校準品系列應保存在2~8°C,于一月內使用。

校準品濃度

離心管編號

校準品稀釋液

加入

20IU/mL400pg/mL

F

900µL

100µL  R2

10IU/mL200pg/mL

E

500µL

500µL F

5IU/mL100pg/mL

D

500µL

500µL E

2.5IU/mL50pg/mL

C

500µL

500µL D

1.25IU/mL25pg/mL

B

500µL

500µL C

  • 工作濃度洗滌液的配制:

用純水(蒸餾水或去離子水)將濃縮洗滌液稀釋20倍,即為工作濃度洗滌液。工作濃度洗滌液應保存在2~8,于一月內使用。

  1. 標準操作方法
  • 從鋁箔袋中取出所需數量的微孔板條,裝至微孔板架上。設空白對照1孔,HIV-1 p24校準品ABCDEF2孔,其余各孔為待測樣品,建議每個待測樣品均設置2孔;編號標記。向各孔內分別加入25μL的生物素標記抗體(空白對照孔不加),然后再向各孔內分別加入75μLHIV-1 p24校準品或待測樣品,輕輕振蕩微孔板,使內容物充分混勻。
  • 用封板膜將微孔板密封,置37溫育60分鐘。
  • 棄去微孔板反應孔內液體,每孔(含空白對照孔)加入350μL工作濃度洗滌液,然后將洗滌液棄去。重復洗板共5次,zui后拍干。
  • 每孔加 HRP標記鏈親和素100μL(空白對照孔不加),用封板膜將微孔板密封,置37溫育30分鐘。
  • 棄去微孔板反應孔內液體,每孔(含空白對照孔)加入350μL工作濃度洗滌液,然后將洗滌液棄去。重復洗板共5次,zui后拍干。
  • 每孔加底物緩沖液和顯色劑各50μL(含空白對照孔),用封板膜將微孔板密封,置室溫(18~30)避光溫育30分鐘。
  • 每孔加終止液50μL(含空白對照孔),輕輕振蕩微孔板,使內容物充分混勻。
  • 終止反應后1小時內,用酶標儀在450nm波長處,測定各孔吸光度值,參考波長選擇620-700nm
  1. 數據處理
  • 求出HIV-1 p24抗原校準品的吸光度平均值。
  • HIV-1 p24抗原校準品的吸光度平均值為縱軸,以HIV-1 p24校準品的濃度為橫軸,在雙對數坐標圖上作出標準曲線。
  • 如果待測樣品試驗了2孔,求出待測樣品的吸光度平均值。
  • 將測得的樣品的吸光度值(或吸光度平均值)在上述標準曲線上求出樣品中的HIV-1 p24抗原的濃度。也可以通過軟件用zui小二乘法擬合曲線,求出樣品中的HIV-1 p24抗原的濃度。

【檢驗結果的解釋】

  1. 質量控制:空白對照校準品吸光度值不高于0.050A點(0pg/mL)吸光度值不高于0.100F點(400pg/mL)吸光度值不低于1.000
  2. 對于吸光度值超出校準品F點的樣品,可用校準品稀釋液稀釋適宜倍數后再行測定,樣本中HIV-1 p24抗原濃度值為稀釋后測定值×稀釋倍數。

【檢驗方法的局限性】

  1. 本品僅適用于研究用途,不用于臨床診斷。
  2. 本品僅適用于游離的HIV-1 p24抗原含量的檢測,不能用于總抗原含量的檢測。
  3. 樣本pH應保證在5-10之間,過低或過高的pH可能會造成HIV-1 p24抗原的測量值異常。

【產品性能指標】

  1. 測定范圍:0~400pg/mL
  2. 分析靈敏度:zui低檢測限不高于5pg/mL
  3. 校準品劑量-反應曲線的線性:線性相關系數R>0.9900。典型校準曲線如下圖
  4. 精密性:批內變異系數(Within-Run CV)不高于10%,批間變異系數(Between-Run CV)不高于15%
  5. 特異性:與HIV-1HIV-2env蛋白、pol蛋白和gag蛋白中的p171型)等無交叉反應。
  6. 膽紅素(Bilirubin20mg/dL)、血紅蛋白(Hemoglobin500mg/dL)和血脂(Triolein 3,000mg/dL)對HIV-1 p24抗原的測量值無明顯干擾。
  7. 抗凝劑(肝素0.2mg/mL、檸檬酸鈉100mg/mLEDTA 20mg/mL)對HIV-1 p24抗原的測量值無明顯干擾。

【注意事項】

  1. 本品僅適用于研究用途。
  2. 試劑盒從冷藏環境中取出,應平衡至室溫(18~30)后再使用。未用完的微孔條用自封袋密封保存。
  3. 儲存和溫育時應避光進行。
  4. 不得直接用手接觸終止液。若不慎接觸則應立即用大量自來水沖洗。
  5. 操作應迅速,加樣品時間過長、洗滌后放置太久均可能影響檢測結果的準確性。
  6. 每次測定均應做標準曲線。
  7. 操作應按說明書嚴格進行。嚴格控制反應溫度和時間,并盡量使用移液器加樣,結果判定以酶標儀讀數為準。
  8. 不同批號試劑請勿混用,不要使用過期試劑。
  9. 本品含有部分動物源性物質,操作必須符合國家有關傳染性疾病檢測的實驗室管理及安全的規定,并按有關實驗室規程處理所使用組份及樣品。

【參考文獻】

  1. Allain, J.P., Laurian, Y., Paul, D.A., Verroust, F., Leuther, M., Gazengel, C., Senn, D., Larrieu, M.J. and Bosser, C. Long-term evaluation of HIV antigen and antibodies to p24 and gp41 in patients with hemophilia. Potential clinical importance. N. Engl. J. Med. 317:1114-1121 (1987).
  2. Barre-Sinoussi, F., Chermann, J.C., Rey, F., Nugeyre, M.T., Chamaret, S., Gruest, J., Dauguet, C., Axler-Blin, C., Vezinet-Brun, F., Rouzioux, C., Rozenbaum, W. and Montagnier, L. Isolation of a T-lymphotropic retrovirus from a patient at risk for acquired immune deficiency syndrome (AIDS). Science 220: 868-871 (1983).
  3. Biggar, R.J., Melbye, M., Ebbesen, P., Alexander, S., Nielsen, J.0., Sarin, P. and Faber, V. Variation in human T lymphotropic virus III (HTLV-III) antibodies in homosexual men: decline before onset of illness related to acquired immune deficiency syndrome (AIDS). Br. Med. J. 291:997-998 (1985).
  4. Casey, J.M., Kim, Y., Andersen, P.R., Watson, K.F., Fox, J.L. and Devare, S.G. Human T-cell lympphotropic virus type III: immunologic characterization and primary structure analysis of the major internal protein, p24. J. Virol. 55:417-423 (1985).
  5. Forster, S.M., Osborne, L.M., Cheingsong-Popov, R., Kenney, C., Burnell, R., Jeffries, D.J., Pinching, A.J., Harris, J.R. and Weber, J.N. Decline of anti-p24 antibody precedes antigenaemia as correlate of prognosis in HIV-1 infection. AIDS 1:235-240 (1987).
  6. Goudsmit, J., Lange, J.M., Paul, D.A. and Dawson, G.J. Antigenemia and antibody titers to core and envelope antigens in AIDS, AIDS-related complex, and subclinical human immunodeficiency virus infection. J. Infect. Dis. 155:558-560 (1987).
  7. Higgins, J.R., Pedersen, N.C. and Carlson, J.R. Detection and differentiation by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay of human T-cell lymphotropic virus type III/lymphadenopathy-associated virus- and acquired immunodeficiency syndrome-associated retroviruslike clinical isolates. J. Clin. Microbiol. 24:424-430 (1986).
  8. Hoffman, A.D., Banapour, B. and Levy, J.A. Characterization of the AIDS-associated retrovirus reverse transcriptase and optimal conditions for its detection in virions. Virology 147:326-335 (1985).
  9. Homsy, J., Luciw, P., Cheng-Mayer, C. and Levy, J., Abstract, Int. Congress on AIDS, Paris, June 23 - 25, 1986.
  10. Kalyanaraman, V.S., Sarngadharan, M.G., Poiesz, B., Ruscetti, F.W. and Gallo, R.C. Immunological properties of a type C retrovirus isolated from cultured human T-lymphoma cells and comparison to other mammalian retroviruses. J. Virology 38:906-915 (1981).
  11. Lange, J.M., Coutinho, R.A., Krone, W.J., Verdonck. L.F., Danner, S.A., Noordaa, J. and Goudsmit, J. Distinct IgG recognition patterns during progression of subclinical and clinical infection with lymphadenopathy associated virus/human T lymphotropic virus. Br. Med. J. 292:228-230 (1986).
  12. Levy, J. A.,, Hoffman, A.D., Kramer, S.M., Landis, J.A., Shimabukuro, J.M., and Oshiro, L.S. Isolation of lymphocytopathic retroviruses from San Francisco patients with AIDS. Science 225:840-842 (1984).
  13. McDougal, J.S., Cort, S. P., Kennedy, M.S., Cabridilla, C.D., Feorino, P.M., Francis, D.P., Hicks, D., Kalyanaraman, V.S. and Martin, L.S. Immunoassay for the detection and quantitation of infectious human retrovirus, lymphadenopathy-associated virus (LAV). J. Immunol. Methods 76:171-183 (1985).
  14. Pan, L.Z., Cheng-Mayer, C. and Levy, J.A. Patterns of antibody response in individuals infected with the human immunodeficiency virus. J. Infect. Dis. 155:626-632 (1987).
  15. Pedersen, C., Nielsen, C.M., Vestergaard, B.F., Gerstoft, J., Krogsgaard, K. and Nielsen, J.0. Temporal relation of antigenaemia and loss of antibodies to core antigens to development of clinical disease in HIV infection. Br. Med. J. 295:567-569 (1987).
  16. Popovic, M., Sarngadharan, M.G., Read, E. and Gallo, R.C. Detection, isolation, and continuous production of cytopathic retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and pre-AIDS. Science 224:497-500 (1984).
  17. Sarngadharan, M.G., Bruch, L., Popovic, M. and Gallo, R.C. Immunological properties of the Gag protein p24 of the acquired immunodeficiency syndrome retrovirus (human T-cell leukemia virus type III). Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 82:3481-3484 (1985).
  18. Spira, T.J., Kaplan, J.E., Feorino, P.M., Warfield, D.T., Fishbein, D.B. and Bozeman, L.H. Human immunodeficiency virus viremia as a prognostic indicator in homosexual men with lymphadenopathy syndrome. N. Engl. J. Med. 317:1093-1094 (1987).
  19. Weber, J.N., Clapham, P.R., Weiss, R.A.,Parker, D., Roberts, C., Duncan, J., Weller, I., Carne, C., Tedder, R.S., Pinching, A. J., et al. Human immunodeficiency virus infection in two cohorts of homosexual men: neutralising sera and association of anti-gag antibody with prognosis. Lancet i:119-121 (1987).
  20. Wittek, A.E., Phelan, M.A., Wells, M.A., Vujcic, L.K., Epstein, J.S., Lane, H.C. and Quinnan, G.V. Jr. Detection of human immunodeficiency virus core protein in plasma by enzyme immunoassay. Association of antigenemia with symptomatic disease and T-helper cell depletion. Ann. Intern. Med. 107:286-292 (1987).
  21. Wong-Staal, F. and Gallo, R.C. Human T-lymphotropic retroviruses. Nature 317:395-403 (1985).
  22. Levy, J.A. Pathogenesis of human immunodeficiency virus infection. Microbiol. Rev. 57:183-289 (1993).
  23. Nishanian, P., Huskins, K.R., Stehn, S., Des, R., and Fahey, J.L. A simple method for improved assay demonstrates that HIV p24 antigen is present as immune complexes in most sera from HIV-infected individuals. J. Infect. Dis. 162:21-28 (1990).
  24. Bollinger, R.C. Jr., Kline, R.L., Francis, H.L., Moss, M.W., Bartlett, J.G., and Quinn, T.C. Acid dissociation increases the sensitivity of p24 antigen detection for the evaluation of antiviral therapy and disease progression in asymptomatic human immunodeficiency virus-infected persons. J. Infect. Dis. 165:913-916 (1992).

【生產企業】

企業名稱:上海慧穎生物科技有限公司

    址:上海市嘉定區鶴旋路

郵政編碼:201800

留言框

  • 產品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
上海慧穎生物科技有限公司 版權所有    備案號:滬ICP備12016933號-2

技術支持:化工儀器網    管理登陸    網站地圖

聯系電話:
15821734033

微信服務號

主站蜘蛛池模板: 精品久久久久久影院免费 | www.伊人| 在线日本看片免费人成视久网 | 澳门久久| 我要cao婊网国产 | 亚洲一级色 | 日韩欧美天堂 | 中文字幕最新 | a级高清观看视频在线看 | 青青青国产色视频在线观看 | 亚洲手机在线手机观看高清hd | 精品热久久 | 日本欧美久久久久免费播放网 | 麻豆成人久久精品二区三区小说 | 青青视频在线免费观看 | bt天堂午夜国产精品 | 最新国产在线精品91尤物 | 国产91在| 九九久久国产精品大片 | 精品欧美一区视频在线观看 | 99ri在线视频网 | 国产精品夫妇久久 | 韩国免费特一级毛片 | 老司机免费福利视频无毒午夜 | 在线视频www | 日本乱人伦在线观看免费 | 国产丶欧美丶日韩丶不卡影视 | 亚洲春色综合另类网蜜桃 | 青草香蕉精品视频在线观看 | 国色天香精品亚洲精品 | 国产精品欧美韩国日本久久 | 自拍偷拍一区 | 国产精品视频一区二区三区不卡 | 国产精品成人网 | 亚洲欧美bt | 国产在线观看网址你懂得 | www.欧美在线观看 | 一区二区三区日本 | 亚洲欧美日韩成人一区在线 | 91在线 | 欧美: | 久久天天躁日日躁狠狠躁 |