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大鼠Flt-3配體(Flt-3 ligand)ELISA試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:
  • 產(chǎn)品時間:2024-08-10
  • 簡要描述:上海慧穎生物科技專業(yè)供應(yīng)大鼠Flt-3配體(Flt-3 ligand)ELISA試劑盒,我們專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)營穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)、高效、實用的ELISA試劑盒,公司提供ELISA試劑盒免費代測,ELISA試劑盒批發(fā)價零售,ELISA試劑盒專業(yè)生產(chǎn)廠家,ELISA試劑盒進口品牌!
  • 產(chǎn)品簡介

             大鼠Flt-3配體(Flt-3 ligand)ELISA試劑盒  

檢測原理

本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Flt-3 Ligand 單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的 Flt-3 Ligand與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠Flt-3 Ligand,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,zui后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,F(xiàn)lt-3 Ligand濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Flt-3 Ligand濃度。

試劑盒組成2-8℃保存)

酶標(biāo)板(Coated Wells)

96孔

酶標(biāo)抗體工作液(Enzyme Conjugate)

12ml

10×標(biāo)本稀釋液(Sample Buffer)

12ml

20×濃縮洗滌液(Wash Buffer)

50ml

標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶

2瓶

底物工作液(TMB Solution)

12ml

*抗體工作液(Biotinylated Antibody)

12ml

終止液(Stop Solution)

12ml

準(zhǔn)備試劑與收集血樣

1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反復(fù)凍融。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,*管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在*管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。

3. 10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。

4. 洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)

檢測程序

1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。

2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。

3. 每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。

4. 洗板:同前。

5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。

6. 洗板:同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。

8. 每孔加入100ul終止液混勻。

9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。

結(jié)果計算與判斷

1. 所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。

2. 以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Flt-3 Ligand含量。

試劑盒性能

1. 靈敏度:zui小的Flt-3 Ligand 檢測濃度小于15pg/ml。

2. 特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠Flt-3 Ligand。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。

3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。

大鼠Flt-3配體(Flt-3 ligand)ELISA試劑盒

注意事項

1. 以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致精確度誤差及OD值錯誤地升高。

3. 板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。

4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。

5. 本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!

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