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ELISA試劑盒不同種類的原理不一樣

發(fā)布時(shí)間:2012-07-17瀏覽:1353次

人白介素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

    ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白介素23(IL-23)水平。用純化的人白介素23(IL-23)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素23(IL-23),再與HRP標(biāo)記的白介素23(IL-23)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素23(IL-23)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素23(IL-23)濃度。

    上海ELISA試劑盒它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

    上海ELISA試劑盒在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) ②酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)③酶作用的底物(顯色劑)

    測量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。
 

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