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定量檢測ELISA試劑盒使用注意事項

發(fā)布時間:2012-07-04瀏覽:1374次

  【操作程序總結(jié)】
  
  準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
  
  加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
  
  洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
  
  洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘
  
  加入終止液
  
  15分鐘之內(nèi)讀OD值
  
  計算
  
  【檢測范圍】
  
  15.6-1000pg/ml
  
  【規(guī)格】
  
  96T/盒
  
  【貯藏】
  
  2-8℃,避光防潮保存。
  
  【有效期】
  
  6個月

  【樣本要求】
  
  1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
  
  2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
  
  3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
  
  【注意事項】
  
  1、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
  
  2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
  
  3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
  
  4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
  
  5、本試劑盒定量范圍為15.6-1000pg/ml,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(15.6-1000pg/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
  
  6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。
  
  7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
  
  8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
  
  9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
  

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