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CL-14細胞,人結腸癌細胞

發布時間:2024-05-06瀏覽:509次

細胞名稱:CL-14細胞

中文名稱:人結腸癌細胞株

一、組成:

組份

數目

細胞

 1 T-25

細胞說明書

一份

二、細胞簡介:

生長特性:

貼壁生長

細胞來源:

DSMZ細胞庫

培養條件

培養基:90%胎牛血清+10%FBS

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37

培養:

一、貼壁細胞

1.75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,第一次傳代比例為1:2

3傳代步驟:將0.25%EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓輕拍瓶壁見細胞脫落為最佳消化時間,記錄較適合消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml完培終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入完培重懸細胞,進行傳

 

二、懸浮細胞

1.75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養基,然后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基);

3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,第一次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。

 

細胞總數:

1~3*106

傳代周期:

2-3

傳代比例:

1:2~1:4

換液頻率:

2-3

凍存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項:

1 收到細胞后首先觀察T-25是否有損壞漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系

2 瓶中運輸的培養液不能重復使用,請換新鮮培養液培養

3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續培養,剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力并與本公司銷售人員及時聯系

4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,如細胞狀態出現問題請于72h與本公司銷售聯系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態良好,不免費對后續細胞狀態問題進行售后

5 因細胞產品的特殊性,如客戶對本公司細胞質量存有疑問,請于收到細胞后兩個月內與本公司銷售聯系,超過時間段,本公司則默認細胞質量優良,不承擔因細胞產生的任何責任。

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